久久久日本一区-麻豆精品秘麻豆入口sm-国产成人一区二区三区电影网站-97精品一区二区三区熟女人妻-久久久激情影院-日韩免费高清人妻-激情综合网五月激情俺-亚洲视频av在线看-懂色av一二三三区免费,亚洲成人网男的天堂,国产av日韩精品久久久久久,日韩av在线高清免费观看

多聚磷酸對GFP相態(tài)轉(zhuǎn)變的影響,首 先，分別觀測了LB培養(yǎng)基中表達(dá)了GFP的細(xì)菌與SMW培養(yǎng)基（低養(yǎng)分培養(yǎng)基）中細(xì)菌表達(dá)的GFP的狀態(tài)。多聚磷酸廠家,多聚磷酸價(jià)格。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，LB培養(yǎng)基中的細(xì)菌GFP均勻分散在菌體中，而SMW培養(yǎng)基中的細(xì)菌蛋白發(fā)生了明顯的相分離，蛋白分別聚集于菌體的兩端。由于兩種培養(yǎng)基中細(xì)菌內(nèi)多聚磷酸含量具有差異，因此設(shè)想這種相分離的發(fā)生與細(xì)菌內(nèi)部的多聚磷酸有關(guān)。

接下來，利用陽離子染料DAPI對細(xì)菌內(nèi)部的多聚磷酸進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)在發(fā)生相分離的細(xì)菌體中，GFP的綠色熒光點(diǎn)與多聚磷酸包裹的DAPI形成的黃色點(diǎn)發(fā)生重合，這則初步證實(shí)了多聚磷酸與蛋白的相互作用誘發(fā)了這種相分離行為。
動(dòng)態(tài)過程顯示，綠色熒光蛋白在濃度逐漸增高的多聚磷酸的作用下逐漸發(fā)生聚集，最后在30分鐘時(shí)在細(xì)菌的兩端形成蛋白微液滴結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中，通過逐漸調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的養(yǎng)分濃度來控制細(xì)菌內(nèi)的多聚磷酸含量，結(jié)果在60分鐘時(shí)，GFP依舊發(fā)生了聚集。而反過來，逐漸提高培養(yǎng)基中的養(yǎng)分，原本聚集的GFP又分散開來。以上現(xiàn)象充分證明了多聚磷酸對GFP的相分離起到了重要作用。

多聚磷酸含量對蛋白聚集的影響
隨后，在菌體外進(jìn)行了液-液相分離機(jī)理的研究。首 先，發(fā)現(xiàn)未加入多聚磷酸的GFP溶液始終是澄清的，而加入了多聚磷酸的GFP溶液隨時(shí)間推移發(fā)生渾濁，顯微鏡下可以明顯觀測到在該溶液中存在蛋白小液滴。以此現(xiàn)象為基礎(chǔ)，通過調(diào)節(jié)多聚磷酸的鏈長以及陰陽離子的比例(R-/+)來對多聚磷酸與蛋白的相互作用機(jī)理進(jìn)行評估。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，多聚磷酸的存在對蛋白的相分離有明顯的促進(jìn)作用；并且隨著多聚磷酸鏈長的增加，蛋白相分離的驅(qū)動(dòng)力變大，越容易發(fā)生蛋白的液-液相分離；與此同時(shí)，電荷比對相分離現(xiàn)象也有明顯的影響，R-/+越大，形成的液滴越大，即越容易發(fā)生相分離。

相關(guān)文章

相關(guān)產(chǎn)品